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Abmgood
產(chǎn)品時間:2020-04-12
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RNAi技術

對于基因調(diào)控和功能研究,abm提供了多種表達系統(tǒng),用于:

 

siRNA:有效表達任何靶siRNA來敲除任何基因,而無需設計發(fā)夾環(huán)shRNA結構,可在慢病毒,AAV和腺病毒中使用。

miRNA:使用我們現(xiàn)成的病毒載體和包裝好的病毒以及我們的檢測和定量工具,抑制或過表達任何miRNA,以研究哺乳動物系統(tǒng)中的轉錄后基因調(diào)控。

UTR Reporters:使用我們的3'UTR或5'UTR平臺定量研究特定miRNA對靶基因的調(diào)控,這些平??臺均可作為針對任何人類,小鼠或大鼠基因的預制慢病毒載體和慢病毒的庫提供。

 

慢病毒siRNA文庫

來自abm的iLenti™RNAi表達系統(tǒng)允許通過轉染或慢病毒感染靶細胞來有效表達任何siRNA。該系統(tǒng)基于*的收斂啟動子設計,可實現(xiàn)更高的靶基因敲除效率,而無需單個啟動子載體中通常使用的發(fā)夾環(huán)結構。abm提供了人類,小鼠和大鼠siRNA的全面文庫,可提供載體或預包裝的慢病毒格式

 

 

iLenti™siRNA的優(yōu)點:

 

慢病毒載體中的siRNA,用于轉染或病毒感染。

非常穩(wěn)定和高產(chǎn)的質(zhì)粒;不需要特殊的感受態(tài)細胞。

使用比傳統(tǒng)的19或21 bp寡核苷酸更有效的27-29 bp寡核苷酸。

聚合啟動子可避免發(fā)夾環(huán)結構,使測序和質(zhì)粒生長更加容易。

GFP報告基因,用于監(jiān)測轉染或病毒感染。

所有構建體均可以載體或病毒形式獲得,包括用于改善基因敲除的合并病毒。

 

siRNA集是否由帶有shRNA或siRNA的慢病毒載體組成?您是否驗證RNA干擾?

我們的RNA干擾慢病毒載體包含siRNA。我們采用雙收斂啟動子系統(tǒng),其中siRNA的有義和反義鏈由兩個不同的啟動子表達,而不是在發(fā)夾環(huán)中表達-以避免可能發(fā)生的任何重組事件。

 

如果您感興趣的基因沒有經(jīng)過驗證和發(fā)布的siRNA序列,我們將使用siRNA設計軟件來定位合適的靶位點。如果這些設計的siRNA在您的實驗中不能有效地降低基因表達,我們將提供一次替代(免費),其中將包含一組新的序列供您嘗試。

 

Abm保證一組購買的四個siRNA Lentivector構建物中少有一個在合適的靶細胞中具有超過70%的擊倒效率,顯示出> 80%的轉染效率。如果仍然認為這四個構建體無效,那么該基因很可能對siRNA敲低不敏感。

 

慢病毒miRNA表達

miRNA模擬物用于功能評估,并用作功能獲得研究的有用的外源工具。abm的表達miRNA的慢病毒可讓您的細胞系穩(wěn)定,長期表達miRNA。

 

為了滿足您的所有需求,我們提供同時表達初級miRNA和成熟miRNA的miRNA慢病毒。初級miRNA的表達意味著將表達miRNA周圍的整個區(qū)域,并且前體的兩個臂都將被加工,就像它是內(nèi)源的一樣。我們成熟的miRNA表達載體是專為高水平表達和加工成熟miRNA而設計的。

 

 

主要特征

 

我們提供了來自人類,小鼠和大鼠的6500多個成熟和主要miRNA的集合。

慢病毒遞送,用于將遺傳物質(zhì)整合到宿主細胞中,引起穩(wěn)定的長期基因表達。

慢病毒具有廣泛的宿主范圍,可以感染分裂細胞和非分裂細胞,從而可以將基因傳遞給多種細胞類型。

 

產(chǎn)品信息

miRNA結合

工作流程

我們提供合成,載體或病毒形式的miRNA過表達/模擬產(chǎn)物和miRNA抑制劑,以適合您的實驗。

pLenti-III-mir-GFP,pLenti-III-mir,pLenti-III-mico-GFP,pLenti-III-mico矢量圖

載體圖

我們的miRNA過表達產(chǎn)品可提供或不提供GFP,并可提供過早的miRNA插入片段或成熟的5p和3p miRNA插入片段。

 

什么是Sanger miRBase序列數(shù)據(jù)庫?

miRBase是由Sanger研究所建立的序列數(shù)據(jù)庫。microRNA Registry中的每個條目均代表microRNA轉錄本的預測發(fā)夾部分(在數(shù)據(jù)庫中稱為mir),其中包含有關成熟microRNA序列(稱為miR)的位置和序列的信息。該數(shù)據(jù)庫在結果發(fā)布之前為microRNA基因獵人提供了新穎的microRNA基因的唯yi名稱,并為已發(fā)布的microRNA提供了可搜索的數(shù)據(jù)庫。

 

       pLenti-III-miR-Off系統(tǒng)或LentimiRa系統(tǒng)使用空白載體進行對照,但我通常使用加擾對照進行si-RNA實驗。是否支持使用未加擾的miRNA實驗空白對照?

加擾和空白對照都是有效的陰性對照。但是,在使用加擾序列時,脫靶效應存在爭議。通過使用空白載體作為陰性對照,可以消除脫靶效應。如果您的實驗需要對空白控件進行加擾的控件,我們也可以根據(jù)要求為您定制。

pre-miRNA和GFP是否都在同一CMV啟動子下?如果是,那么兩者之間是否存在翻譯切割位點?

是的,pre-miRNA和GFP都在同一CMV啟動子下。

 

兩者之間沒有翻譯切割位點。

 

轉錄終止位點在pre-miRNA之后,因此GFP和pre-miRNA一起轉錄,因此使GFP成為miRNA的實際轉錄報告基因。mRNA的pre-miRNA區(qū)域自身折疊并形成莖環(huán)結構,該莖環(huán)結構將在細胞中被Drosha / Pasha酶處理,并從mRNA的GFP部分切割下來。

 

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