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CD19(RM)【RM332】Biocare說明書-試驗(yàn)方法
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性:
在2oC至8oC的溫度下儲(chǔ)存。該產(chǎn)品在打印的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的
小瓶標(biāo)簽,當(dāng)在這些條件下儲(chǔ)存時(shí)。過期后請(qǐng)勿使用
日期必須在定條件以外的任何條件下儲(chǔ)存
已證實(shí)的應(yīng)及時(shí)使用稀釋的試劑;存儲(chǔ)剩余的
試劑溫度為2oC至8oC。用戶稀釋試劑的穩(wěn)定性尚未
由Biocare建立。
陽(yáng)性和陰性對(duì)照應(yīng)與所有患者同時(shí)進(jìn)行
標(biāo)本。如果觀察到無(wú)法解釋的意外染色
實(shí)驗(yàn)室程序的變化和抗體的問題是
如有疑問,請(qǐng)致電或通過
biocare上提供的技術(shù)支持信息。
試樣制備:
固定在福爾馬林中的組織適合在石蠟包埋之前使用。
骨組織應(yīng)在組織加工前脫鈣,以促進(jìn)
組織切割,防止切片機(jī)刀片損壞。1,2
正確固定和嵌入表達(dá)特定抗原靶標(biāo)的組織
應(yīng)存放在陰涼處?!杜R床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)法案》
CD19(RM)【RM332】
濃縮預(yù)稀釋兔單克隆抗體
901-3270-060223
TP v1(2021年10月15日)
(CLIA)在《美國(guó)聯(lián)邦法規(guī)匯編》第42卷第493.1259(b)節(jié)中要求“實(shí)驗(yàn)室必須
自檢查之日起至少保留十年的染色玻片,以及
自檢查之日起至少保留兩年的試塊。"3.
染色前的組織處理:
按照推薦方案進(jìn)行熱誘導(dǎo)表位檢索(HIER)
在下面在IHC之前,HIER的常規(guī)使用已被證明可以最大限度地減少
不一致性和標(biāo)準(zhǔn)化染色。4, 5
警告和注意事項(xiàng):
1.該抗體含有少于0.1%的疊氮鈉。濃度較少
根據(jù)《美國(guó)聯(lián)邦法規(guī)匯編》第29卷,超過0.1%為不可報(bào)告的危險(xiǎn)品
1910.1200,OSHA危險(xiǎn)通信和EC指令91/155/EC。
用作防腐劑的疊氮鈉(NaN3)如果攝入會(huì)有毒。疊氮鈉
可能與鉛和銅管道發(fā)生反應(yīng),形成高爆炸性金屬
疊氮化物。處理后,用大量水沖洗以防止疊氮化物
管道中的積聚。(疾病控制中心,1976年,美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生研究所
職業(yè)安全與健康,1976)6
2.固定前后的樣本,以及暴露在其中的所有材料
應(yīng)該像能夠傳播感染一樣處理,并用
適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施。切勿用嘴移取試劑,避免接觸
皮膚和粘膜與試劑和標(biāo)本。如果試劑
或標(biāo)本接觸到敏感區(qū)域,用大量清水沖洗
水量。7
3.試劑的微生物污染可能導(dǎo)致
非特異性染色。
4.規(guī)定以外的培養(yǎng)時(shí)間或溫度可能會(huì)
錯(cuò)誤的結(jié)果。用戶必須驗(yàn)證任何此類更改。
5.超過小瓶上打印的有效期后,請(qǐng)勿使用試劑。
6.稀釋前的抗體試劑被最佳稀釋以供使用。進(jìn)一步稀釋
可能導(dǎo)致抗原染色的損失。
7.濃縮抗體試劑的稀釋度必須在使用前進(jìn)行驗(yàn)證。
未特別推薦使用的任何稀釋劑也必須經(jīng)過驗(yàn)證
兼容性和穩(wěn)定性。
8.SDS可應(yīng)要求提供.
使用說明:
CD19(RM)的推薦染色方案[RM332]:
IntelliPATH FLX和手動(dòng)使用:
用于intelliPATH FLX和手動(dòng)使用的API3270,已被
采用MACH 4檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。使用TBS
洗滌步驟。
過氧化物
阻斷:用過氧化1阻斷5分鐘。
預(yù)處理:
使用Diva進(jìn)行熱量回收
Declaker。參考Diva Decloker
具體說明的數(shù)據(jù)表。
蛋白質(zhì)塊
可選擇的
在RT下培養(yǎng)5-10分鐘
背景懲罰者。
主要的,重要的
抗體:RT培養(yǎng)30分鐘。
查
探頭:不適用
在RT下用
二次聚合物。
聚合物:室溫下培養(yǎng)30分鐘
具有叔聚合物。
色原:
在RT下培養(yǎng)5分鐘
Biocare的DAB–OR–在
RT搭配Warp Red。
會(huì)簽:
蘇木精沉印。用沖洗
去離子水。應(yīng)用Tacha的腮紅
溶液1分鐘。用去離子水沖洗
水
ONCORE Pro自動(dòng)幻燈片染色系統(tǒng):
OPAI3270適用于ONCORE Pro。提到
有關(guān)具體使用說明,請(qǐng)參閱用戶手冊(cè)。協(xié)議
協(xié)議編輯器中的參數(shù)應(yīng)編程為
跟隨:
方案名稱:CD19 Rb
協(xié)議模板
【說明】:Rb-HRP模板1
脫蠟(DS緩沖液
選項(xiàng)):DS2-50
抗原回收(AR
可選):AR1,高pH;101?C
塊選項(xiàng):緩沖區(qū)
試劑名稱、時(shí)間、,
溫度:CD19 Rb,30分鐘,25°C
Ventana BenchMark ULTRA:
AVI3270適用于BenchMark ULTRA。參考
有關(guān)具體使用說明,請(qǐng)參閱用戶手冊(cè)。
建議的協(xié)議參數(shù)如下:
模板/檢測(cè):OptiView DAB IHC
預(yù)處理方案:CC1 32分鐘
過氧化物酶:初級(jí)前過氧化物酶
抑制劑
初級(jí)抗體:16分鐘,36°C
Q系列-對(duì)于徠卡BOND-III:
ALI3270適用于徠卡BOND-III。參考
有關(guān)具體使用說明,請(qǐng)參閱用戶手冊(cè)。
建議的協(xié)議參數(shù)如下:
染色原染色
選項(xiàng)DAB
協(xié)議名稱:IHC協(xié)議F
檢測(cè):粘合聚合物精制
HIER:20分鐘,ER2
過氧化物塊:5分鐘
標(biāo)記(主要
抗體):15分鐘
小學(xué)后:8分鐘
聚合物:8分鐘
混合色原
精煉:10分鐘
蘇木精:5分鐘
質(zhì)量控制
參考CLSI的設(shè)計(jì)和實(shí)施質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
免疫組織化學(xué)分析;批準(zhǔn)的指南第二版(I/LA28-
A2)CLSI Wayne,PA USA。20118
陽(yáng)性組織對(duì)照:扁桃體
外部陽(yáng)性對(duì)照材料應(yīng)為新鮮標(biāo)本固定,
以與相同的方式盡快處理和嵌入
患者樣本。陽(yáng)性組織對(duì)照表明制備正確
組織和適當(dāng)?shù)娜旧夹g(shù)。一個(gè)陽(yáng)性外部組織對(duì)照
對(duì)于每組測(cè)試條件,應(yīng)包括在每次染色運(yùn)行中。
應(yīng)選擇用于外部陽(yáng)性對(duì)照材料的組織
來(lái)自具有良好特征的低水平陽(yáng)性的患者樣本
產(chǎn)生弱陽(yáng)性染色的靶活性。的低陽(yáng)性率
外部陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)計(jì)是為了確保檢測(cè)到細(xì)微的
不穩(wěn)定或問題引起的一級(jí)抗體敏感性變化
IHC方法。市售組織對(duì)照載玻片或
與患者樣本不同處理的樣本驗(yàn)證試劑
僅性能,不驗(yàn)證組織準(zhǔn)備
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