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EIGHT (8)測試樣品中的光聚集和 Ristocetin 輔因子測試

CHRONO-LOG 型號4904 + 4光學聚合系統(tǒng)現(xiàn)已推出(4)或(8)通道配置，由一個或兩個4通道模塊組成: 型號4904 +-可單獨購買，包括測試通道(1)至(4) ，內(nèi)部 AGGRO/LINK 計算機接口與(2)軟件包... AGGRO/LINK Opti8用于執(zhí)行聚合，vW CoFactor Opti8用于執(zhí)行 Ristocetin 輔因子測試，外加一套試劑和初始用品。型號490 + 4-擴展4通道模塊到(8)通道... 測試通道(5)通過(8) ... 只需要一個單一的互連電纜。型號4904 + 4-一個完整的8通道系統(tǒng)[2,4通道模塊]

樣品體積-250μL [不需要間隔]或500μL 連續(xù)監(jiān)測，并發(fā)出警告信息: 溫度、攪拌速度和超量程檢測，以防止在基線未設(shè)置的情況下操作。帶按鈕設(shè)置的液晶顯示器用新的校準改進光學電路的校準用定制/可選的跟蹤顏色

使用新型 CHRONO-LOG 型號4904 + 48通道光學聚集系統(tǒng)，在 LTA 血小板聚集試驗上花費了太多的時間、樣品和試劑

怎么做到的？減少抽血量... 理想的小樣本，因為每次測試只需要250μL 的 PRP，每次測試使用更少的試劑... 省錢！提高周轉(zhuǎn)時間... 一(1)運行和完成！使用(2)自動數(shù)據(jù)處理，(1)膠原蛋白，(1)花生四烯酸，(1)腎上腺素，(2)里斯托西汀和(1)其他試劑進行測試。保持準確性... 以及你期望的可靠性，通過改進光學電路的自校準 Chrono-log

臨床應(yīng)用: 血管性血友病的診斷研究抗血小板治療的監(jiān)測效果

研究應(yīng)用: 血小板研究藥物研究用丙酸鈉，洗滌或凝膠過濾血小板檢測肝素誘導的低血小板計數(shù)

測試通道: 4個通道[一個模塊]或8個通道[兩個，四個通道模塊]與: 光聚集測試 PRP，凝膠過濾或洗滌血小板超量程檢測，以防止操作，如果基線沒有設(shè)定。前面板顯示和控制: 液晶顯示-24個字符 x 2行液晶顯示，每個通道顯示一個: 顯示溫度攝氏度，攪拌轉(zhuǎn)速，PPP/參考選擇，校準模式和警告信息。設(shè)置基線按鈕-將聚合基線設(shè)置為0% 。選擇按鈕-選擇溫度，攪拌速度和 PPP/參考[一個按鈕選擇(2)通道]。設(shè)置按鈕-調(diào)整溫度，攪拌速度和 PPP/參考[一個按鈕設(shè)置(2)渠道]。校準開關(guān). 光學電路的按鍵激活校準。加熱器塊-電子控制可設(shè)置在35.0 oC 和39.0 oC 之間的0.1 oC 的步驟。攪拌器-400至1200轉(zhuǎn)每分鐘在100轉(zhuǎn)每分鐘的步驟與“攪拌停止"的立場。

試樣體積: 250uL 或500uL 樣品[微量試驗不需要間隔]試管: P/N 312攪拌棒: 可重復使用的聚四氟乙烯涂層 P/N 313，一次性 P/N 311通用規(guī)格(每個模塊) : 功率要求-開關(guān)可選115或230伏交流電; 50/60赫茲，最大150瓦特。尺寸-14英寸(35.5厘米)寬，8.5英寸(21.6厘米)高，15英寸(38厘米)深重-19.3磅。(8.75公斤)孵化井-每個通道2個井，每個井@36.5 oC + 1.0 oC，當溫度設(shè)定在37 oC 時輸出: 系列: 內(nèi)部 AGGRO/LINK 接口，用于計算機和 AGGRO/LINK 以及 vW CoFactor Opti8軟件。模擬: 后底盤上的連接器，用于與條形圖記錄器的接口。

在1.0 mL 樣品中——通常為450μL 血液，用450μL 生理鹽水加100μL CHRONO-LUME 試劑稀釋，當用 Ristocetin 測試時，沒有 CHRONO-LUME 的1.0 mL 血液樣品。* * 在用 Ristocetin 測試時，在500μL 樣品-通常為450μL 富含血小板的血漿加50μL CHRONO-LUME 試劑或沒有 CHRONO-LUME 的500μL 富含血小板的血漿中。(對于250μL 微體積的樣品，用 P/N 365橡膠墊片以半衰期法減少體積。)注釋單位，注釋單位，注釋單位，注釋單位，注釋單位。最終指令。每單位測試容量每個測試單位 WB/PRP WB/PRP * PRP * * WB PRP386凝酶1.0 mL 10 Unit/mL 1 Unit 100μL50μL1020385膠原1.0 mL 1mg/mL 2μg/mL 2μL1μL5001000390花生四烯酸0.7 mL 50 mM 0.5 mM 10μL5μL70140396 Ristocetin 0.5 mL 125 mg/mL 1.0 mg/mL/8μL5μL621001.25 mg/mL395 Chrono-lume 4x1.25 mL N/A N/A 100μL50100384ADP5.0 mL 1mM10μL5μL5001000393腎上腺素5.0 mL/50 mL 10mM/1mM50μM/5μM5μL2.5 μL10001000387 ATP 標準5.0 mL 2μmol2nmol 5μL5μL10001000導電測試注意: 不需要多種庫存溶液。要改變最終濃度，調(diào)整移液管容量。

由于每次測試只需要微量的試劑，因此必須避免引入過量的試劑。因此，在抽取試劑后擦拭微量移液管端外側(cè)，以除去附著在端外側(cè)的多余試劑。不要將試劑放入試管上方或試管側(cè)面，因為試劑會附著在試管側(cè)面，不會與樣品混合。使用 AGGRO/LINK 與 Windows 兼容軟件和遵循 NCCLS GP2-A3格式的程序可在磁盤上或通過電子郵件獲得: •全血聚集•全血聚集與 ATP 釋放• PRP 光聚集•光聚集與 ATP 釋放控制和患者樣本-收集已知影響血小板和患者樣本的藥物的正?？刂?，將其收集到無菌真空管中，不可濕襯里和1/10體積的3.2% 緩沖檸檬酸鈉。抽取20-30毫升血液進行光學 PRP 檢測，或抽取5-10毫升血液進行全血檢測。

參考文獻(1) Ingerman-Wojenski CM 和 Silver MJ: 一種用全血光度計快速篩查血小板功能障礙的方法。1984年止帶51-2(154-156)。(2) White M MC，Jennings LK: 血小板方案: 研究和臨床實驗室程序。學術(shù)出版社，1999年。(3) Podczasy JJ，Lee J，Vucenik I: 全血光聚集的評價?？肆?/span> · 阿普爾。血栓/止血，3(3) : 190-195,1997。(4) Sweeney JD，Hoernig LA，Michnik A 和 Fitzpatrick JE: 全血聚集測定法。樣本采集和學習成績延遲對測試結(jié)果的影響。Am J ClinPathol 1989; 92:676-679.(5) Feinman RD，Detwiler TC 和 Ingerman-Wojenski C: 作為研究和臨床工具的 Lumi 聚合度計。生理學和藥理學。版權(quán)所有1985年由學術(shù)出版社公司(6) Sirridge，M: 出血病人的實驗室評估。臨床檢驗醫(yī)學，第4卷，第2期，1984年6月。(7) Nieuwenhuis HK，Akkerman J-W N 和 Sixma JJ: 出血時間延長和聚集測試正常的患者可能存在儲存池缺陷: 對106名患者的研究。血70-3(620-623)1987。(8) Sweeney JD，Hoernig LA and Fitzpatrick JE: 血管性血友病中的全血聚集。Am J Hematol 32:190-193(1989).(9) UMDNJ，Spec.新不倫瑞克止血實驗室。

(10) Sweeney JD，Hoernig LA，Behrens AN，Novak E，and Swank RT: Von Willebrand’s Variant (type II Buffalo)。美國臨床病理學雜志，第93卷，第4期，(522-525)1990年。(11) Miller JL: 血小板型血管性血友病。血栓和止血第7卷，第4期，1985年。(12) Taylor ML，Misso NLA，Stewart GA，Thompson PJ: 不同劑量的阿匹林對 PAF，膠原蛋白和花生四烯酸誘導的人血小板活化的影響.Br J Clin Pharm. ，(1992) ，33,25-31。(13)蘭辛英厄姆醫(yī)療中心。(14) Riess H，Braun G，Brehm G 和 Hiller E: 人全血血小板聚集的評價。我是 J ClinPathol。第85卷，第1期，(50-56)1986。(15) Gengo FM，Rainka M，Robson M，Gengo MF，Forrest a，Hourihane M 和 Bates v: 接受二級卒中預防治療的患者和復發(fā)性缺血事件患者中血小板對阿匹林無反應(yīng)的患病率?？肆炙幚韺W雜志，第48卷，第3期，335-343頁，2008年。(16) Pyle-Eilola，Amy L. ; Carter，Chris M. ; Cucci，Jodi; Chandler，Wayne L: 全血發(fā)光血小板聚集測定參考區(qū)間的建立。AACC 2017年海報。

引言 CHRONO-PAR 和 CHRONO-LUME 試劑用于確認正常血小板功能和診斷血小板功能障礙。以下 CHRONO-PAR 和 CHRONO-LUME 試劑適用于全血和血小板富血漿: ADP (P/N 384)-在 PRP 中，低濃度(< 1μM) ，形狀變化之后是原發(fā)性聚集和解聚。在較高濃度的1-5μM 時，通?？梢钥吹诫p相反應(yīng)。第二波聚集需要血栓素 A2的合成，并受環(huán)氧化酶抑制劑如阿匹林的影響。ADP 在全血中的聚集需要更高濃度的 ADP (通常為5-20μM)。

花生四烯酸(P/N 390)-前列腺素合成的直接測試，因為聚集需要通過環(huán)氧化酶轉(zhuǎn)化為血栓素 a 2，這一過程被阿匹林抑制。從沒有聚集到低于正常范圍的反應(yīng)通常表明藥物攝入在前幾天的某個時間。 ATP 標準(P/N 387)-用于定量 ATP 釋放。提供2μmol 凍干的5’三磷酸腺苷。5μL 加入任何大小的測試樣品提供2nmol 標準。 CHRONO-LUME (P/N 395)-用于定量 ATP 釋放在阿匹林檢測中的使用和儲存池和分泌障礙的診斷。熒光素-熒光素酶與 ATP 結(jié)合，產(chǎn)生光，這與測試樣品中血小板釋放的 ATP 量成正比。注意: CHRONO-LUME 反應(yīng)是時間和溫度依賴性的。在開始測試之前，確保每個樣品只有兩分鐘的溫育時間。膠原蛋白(P/N 385)-測試樣品加入試劑后出現(xiàn)滯后期，在此期間膠原蛋白聚合成纖維以激活血小板。低濃度的膠原蛋白(1-2μg/mL)被環(huán)氧合酶抑制劑如阿匹林抑制; 正常情況下，較高濃度(5μg/mL)不受影響。腎上腺素(P/N 393)-該激動劑未見形狀變化。較高濃度(≥5μM)產(chǎn)生依賴于血栓素 A2合成的第二波聚集的雙相曲線。臨床上不推薦使用腎上腺素作為全血檢測的標準激動劑，因為只有不到50% 的激動劑對這種非常弱的激動劑有反應(yīng)。腎上腺素全血測試的推薦抗凝檸檬酸鈉為1.5% ，每毫升檸檬酸鹽含2 U 肝素。

Ristocetin (P/N 396)-用于檢測血管性血友病(血管性血友病因子的定量或定性缺陷)和巨大血小板綜合征(缺乏血小板膜糖蛋白 GPIb)和具有聚集-解聚模式的格蘭茲曼氏血小板減少癥。Ristocetin 的結(jié)果也可能受到阿匹林的影響。凝酶(P/N 386)-用于1U/mL 時的最大 ATP 釋放量的定量，不用于聚集。凝酶的分泌與血栓素的合成無關(guān)。凝酶分泌減少可能表明儲存池缺乏或分泌缺陷。注意: CHRONO-PAR 試劑在環(huán)境溫度下運輸。到達后，按照建議存放。

所需但未提供的材料1。聚合度計2。杯子3。攪拌巴斯4。微量移液管-可調(diào)節(jié)從0.5 μL 到100μL 所需的試劑。5。血液樣本所需的移液管-100μL 至1mL。6。CHRONO-LOG P/N 397生理鹽水或無菌生理鹽水(0.85% 或0.9% w/v)用于 CHRONOPAR 試劑制備和全血標本稀釋避免血庫鹽水，因為它可能是不正確的摩爾比。細胞計數(shù)器稀釋劑不合適，因為它們含有 EDTA，可以抑制血小板聚集。輸液鹽水是不合適的，因為它們含有芐醇或其他抑制血小板功能的防腐劑/添加劑。7。CHRONO-LOG P/N 398純凈水或無菌瓶裝蒸餾水適用于 CHRONO-PAR 試劑的制備。重組試劑應(yīng)無熱原(不含 ATP) ，不含防腐劑，如抑制血小板功能的苯甲醇。不要使用 Millipore 系統(tǒng)中的水。8。用于在適當溫度下保持重組工作試劑的冰。9。塑料圓錐管10。KimWipes 11.電極組件[可重復使用]12。電極組件[一次性]ー參見試劑說明書。

結(jié)果的解釋血液和 PRP 中的聚集和發(fā)光 ATP 分泌曲線可以解釋如下: 通過直接比較一個正常的無藥物控制，也提供實時質(zhì)量控制。與可由任何實驗室核實和復制的公布的正常值進行比較。膠原蛋白或花生四烯酸釋放的三磷酸腺苷相當于或超過凝酶釋放量的50% 。•在對106名儲存池缺陷(SPD)患者的研究中，23% 對 ADP，腎上腺素和膠原有正常的光學(PRP)聚集反應(yīng); 44% 有各種聚集異常。作者的結(jié)論是，SPD 是常見的，不均勻的，并不一定與光學(PRP)聚集異常有關(guān)。7•同時測量聚集和 ATP 釋放提供了密集顆粒分泌的明確證據(jù)。5據(jù)報道，應(yīng)考慮的儲存池缺陷閾值小于0.5 nmoleATP 對1U 凝酶的反應(yīng)。4局限性•應(yīng)在靜脈穿刺3小時內(nèi)進行測試。•許多藥物抑制血小板功能。除非檢測的目的是證明藥物引起的抑制作用，否則患者應(yīng)在檢測前兩周內(nèi)不服用已知會影響血小板的藥物。•血小板計數(shù) < 225,000/μL，運行 ADP 測試 UNDILUTED?？赡苄枰M一步的臨床和實驗室評估來確認診斷。質(zhì)量控制良好的實驗室實踐是，每當試劑組成或解凍時，運行一個正常的供體，不含已知會影響血小板的藥物。不能證明在正常對照中聚集和釋放已知會影響血小板的藥物的保質(zhì)期之前和按指示儲存和重組的保質(zhì)期試劑，可以免費更換。本保修條款僅適用于美國。

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