服務(wù)熱線(xiàn)
15201163601
產(chǎn)品展示PRODUCTS
北京華新康信生物科技有限公司代理Novus品牌。北京華新康信生物科技有限公司是Novus品牌代理商。
NBP1-71648 Novus 大量現(xiàn)貨,歡迎電聯(lián),真誠(chéng)合作共贏。
NBP1-78159 Novus 大量現(xiàn)貨,歡迎電聯(lián),真誠(chéng)合作共贏。
Novus Novus 北京代理,Novus 北京總代理,Novus華北代理,Novus華東代理,Novus華南代理, Novus華中代理,Novus代理,Novus 代理,Novus產(chǎn)品,Novus現(xiàn)貨,Novus各系列產(chǎn)品,Novus知識(shí)介紹,Novus技術(shù)服務(wù),Novus咨詢(xún)服務(wù),Novus合作服務(wù),歡迎電聯(lián),真誠(chéng)合作,合作共贏。
Novus代理 北京華新康信生物科技有限公司
產(chǎn)品列表如下:
產(chǎn)品貨號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 品牌
NBP1-71648 Mouse Monoclonal mtTFA Antibody (18G102B2E11) NOVUS
H00011232-B01P Mouse Polyclonal POLG2 Antibody NOVUS
NB110-7081H Mouse anti-Human IgG4 Fc fragment Secondary Antibody (5C7) [HRP] novus
NBP1-78159 Mouse Monoclonal LDL R Antibody (C7) NOVUS
NB100-56698 Rabbit Polyclonal MyD88 Antibody [IMGENEX: IMG-178] NOVUS
NBP2-62766 Human HMGB1/HMG-1 ELISA Kit (Colorimetric) NOVUS
NBP1-47518AF488 Calreticulin Antibody (1G6A7) [Alexa Fluor 488] novus
北京華新康信生物科技有限公司專(zhuān)注于生命科學(xué)領(lǐng)域,由豐富從業(yè)經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)和管理團(tuán)隊(duì)組建而成,主營(yíng)生物化學(xué)試劑,儀器,實(shí)驗(yàn)耗材等。
1廣泛的產(chǎn)品輻射領(lǐng)域,試劑,耗材,儀器等。
2產(chǎn)品種類(lèi)齊全,北京華新康信與國(guó)外諸多生命科學(xué)領(lǐng)域*合作眾多,代理品牌Glycan Therapeutics,Intact Genomics,Integral Molecular,Medkoo,Niomech,Terragene,Anshlabs wako,EZbioscience,CMCTAG,Anatrance ,F(xiàn)avorage ,Affinity,Advanced biomatrix,bioplastics,天地人和,TRC,凱杰,義翹,sciencell;價(jià)格優(yōu)勢(shì)品牌:seracare,Streck,Toxin,Zeptometrix,sigma,F(xiàn)orteBio,CanSyn,Novus,santa,chormsystems,bethyl ,moltox, permagenlabware ,bioflux,Bio-Rad, coriell, listlabs, ZYMO , ABclonal , EY laboratories ,greatcellsolar , agdia , beckman , Bioxcell,,biomax ,usascientific , TRC ,novus ,americanelements,cayman , Fisher ,thermofisher , nanopore, 日立, 三菱株式會(huì)社 ,RD, takara等,緊跟生命科學(xué)的發(fā)展,不斷滿(mǎn)足客戶(hù)的需求,為各位的科研之路上添磚加瓦!
3 一手貨源,價(jià)格優(yōu)勢(shì)明顯
4信譽(yù)良好,客戶(hù)范圍廣,包括清華、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校,百泰藥業(yè),康龍化成,藥明康德等企業(yè)。
歡迎電話(huà)垂詢(xún)
肽封閉-一種確認(rèn)抗體特異性的方法。
背景:抗體與目標(biāo)表位的特異性結(jié)合是產(chǎn)生準(zhǔn)確表達(dá)數(shù)據(jù)所必需的??贵w與非靶標(biāo)抗原的結(jié)合(也稱(chēng)為非特異性結(jié)合)會(huì)增加背景信號(hào)并使數(shù)據(jù)解釋復(fù)雜化。在蛋白質(zhì)印跡分析中,通常會(huì)通過(guò)多個(gè)條帶輕松識(shí)別非特異性結(jié)合。但是,在免疫組織化學(xué),ELISA,流式細(xì)胞儀,ChIP和其他基于抗體的應(yīng)用中,非特異性抗體結(jié)合的鑒定可能更加困難。
什么是封閉肽?封閉肽是由對(duì)應(yīng)于抗體表位(抗體識(shí)別的抗原的特定片段)的氨基酸序列組成的肽。阻斷肽將與靶抗體特異性結(jié)合,從而防止隨后的抗體與靶表位結(jié)合。
封閉肽如何發(fā)揮作用?可以利用抗體對(duì)其表位的高親和力來(lái)確認(rèn)結(jié)合特異性。用足夠的肽對(duì)抗體進(jìn)行預(yù)溫育會(huì)占據(jù)所有抗體結(jié)合位點(diǎn),從而阻止樣品中后續(xù)靶蛋白的結(jié)合。
運(yùn)行封閉肽測(cè)定后如何知道我的抗體是否特異性?為了確認(rèn)抗體的特異性,比較用對(duì)照抗體和封閉抗體染色的樣品之間的信號(hào)強(qiáng)度。如果抗體對(duì)目標(biāo)表位具有特異性,則與封閉抗體一起孵育的實(shí)驗(yàn)樣品將顯示出比對(duì)照抗體(單獨(dú)的抗體,未封閉)弱的信號(hào)。
在Western blot中我的肽封閉數(shù)據(jù)應(yīng)該是什么樣的?如果抗體與過(guò)量的肽一起孵育并且所有結(jié)合位點(diǎn)都被占據(jù)(封閉),則與封閉抗體一起孵育的樣品應(yīng)無(wú)信號(hào)。
北京華新康信生物科技有限公司代理Novus品牌。北京華新康信生物科技有限公司是Novus品牌代理商。
NBP1-71648 Novus 大量現(xiàn)貨,歡迎電聯(lián),真誠(chéng)合作共贏。
NBP1-78159 Novus 大量現(xiàn)貨,歡迎電聯(lián),真誠(chéng)合作共贏。
Novus Novus 北京代理,Novus 北京總代理,Novus華北代理,Novus華東代理,Novus華南代理, Novus華中代理,Novus代理,Novus 代理,Novus產(chǎn)品,Novus現(xiàn)貨,Novus各系列產(chǎn)品,Novus知識(shí)介紹,Novus技術(shù)服務(wù),Novus咨詢(xún)服務(wù),Novus合作服務(wù),歡迎電聯(lián),真誠(chéng)合作,合作共贏。
Novus代理 北京華新康信生物科技有限公司
蛋白質(zhì)印跡法
介紹
蛋白質(zhì)印跡使用抗體來(lái)識(shí)別細(xì)胞或組織裂解物中的單個(gè)蛋白質(zhì)??贵w與高度特異性的氨基酸序列結(jié)合,稱(chēng)為表位。由于氨基酸序列因蛋白質(zhì)而異,因此蛋白質(zhì)印跡分析可用于鑒定和定量包含數(shù)千種不同蛋白質(zhì)的裂解物中的單個(gè)蛋白質(zhì)。先,通過(guò)SDS-PAGE凝膠電泳根據(jù)蛋白質(zhì)的大小將蛋白質(zhì)彼此分離。接下來(lái),通過(guò)施加電流將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。然后可以用對(duì)目標(biāo)靶蛋白具有特異性的一抗處理該膜。下一個(gè),
裂解液的制備
亞細(xì)胞定位 推薦緩沖液
全細(xì)胞裂解液 NP-40
核 里帕
線(xiàn)粒體 里帕
細(xì)胞質(zhì) 鹽酸
膜結(jié)合蛋白 里帕
吸出PBS,并加入冰冷的裂解緩沖液(每融合10 7個(gè)細(xì)胞/ 100mm皿/ 150 cm 2燒瓶加入1 mL )。請(qǐng)參見(jiàn)下表,以根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞位置推薦裂解緩沖液。
用冰冷的PBS在冰上洗滌細(xì)胞培養(yǎng)皿。
吸出PBS,并加入冰冷的裂解緩沖液(每融合10 7個(gè)細(xì)胞/ 100mm皿/ 150 cm 2燒瓶加入1 mL )。請(qǐng)參見(jiàn)下表,以根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞位置推薦裂解緩沖液。
使用細(xì)胞刮刀,將粘附的細(xì)胞從培養(yǎng)皿上刮下來(lái),并將細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到微量離心管中。如果需要,可以將細(xì)胞用胰蛋白酶消化并用PBS洗滌,然后再重懸于裂解緩沖液中。
在4°C下攪拌細(xì)胞30分鐘。
在4°C下離心細(xì)胞裂解液混合物。時(shí)間和離心力因每種細(xì)胞類(lèi)型而異,但是一般指導(dǎo)原則是在12,000 rpm下20分鐘。
將上清液(裂解液)轉(zhuǎn)移到冰上的新試管中。
樣品制備
確定每個(gè)細(xì)胞裂解液的蛋白質(zhì)濃度。
確定要加載的蛋白質(zhì)量(推薦:10-50μg/泳道),并添加等體積的2X Laemmli緩沖液。
通過(guò)將裂解液在樣品緩沖液中于95-100°C下煮沸5分鐘來(lái)減少樣品并使樣品變性。僅在抗體數(shù)據(jù)表建議使用非還原或非變性條件時(shí)才應(yīng)跳過(guò)此步驟。