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CD19(RM)【RM332】Biocare說明書-試驗結(jié)果
CD19(RM)【RM332】
濃縮預(yù)稀釋兔單克隆抗體
901-3270-060223
TP v1(2021年10月15日)
已知的陽性組織對照應(yīng)僅用于監(jiān)測
處理過的組織和測試試劑的正確性能,而不是
幫助制定患者樣本的特定診斷。如果陽性
組織對照未能顯示陽性染色,測試結(jié)果
標(biāo)本應(yīng)視為無效。
陰性組織對照:
使用固定、處理的陰性組織對照(已知為CD19陰性),
并以與患者樣本相同的方式嵌入
染色運行以驗證IHC一級抗體對
靶抗原的證明,并提供特異性的指示
背景染色(假陽性染色)。此外,不同細(xì)胞的多樣性
大多數(shù)組織切片中存在的類型可以被實驗室用作
內(nèi)部陰性對照站點,以驗證IHC的性能規(guī)范。
可用于陰性組織的標(biāo)本類型和來源
“性能特征"部分列出了控件。
如果陰性組織中出現(xiàn)特異性染色(假陽性染色)
對照組,患者標(biāo)本的結(jié)果應(yīng)視為無效。
非特異性陰性試劑對照:
使用非特異性陰性試劑對照代替初級抗體
用每個患者樣本的一部分來評估非特異性染色,以及
允許更好地解釋抗原位點的特異性染色。理想情況下
陰性試劑對照含有由組織產(chǎn)生的CD19IgG抗體
以與第一抗體相同的方式培養(yǎng)上清液,但沒有顯示出
在與
生物保健抗體。將陰性對照抗體稀釋為相同的抗體
免疫球蛋白或蛋白質(zhì)濃度作為稀釋的第一抗體
使用相同的稀釋劑。如果純抗體中保留了胎牛血清
處理后的胎牛血清,其蛋白質(zhì)濃度相當(dāng)于
在相同的稀釋劑中稀釋的初級抗體也適合使用。參考
至所提供的試劑)。單獨使用稀釋劑可能不太理想
可替代先前描述的陰性試劑對照。這個
陰性試劑對照的潛伏期應(yīng)與
第一抗體的。
當(dāng)在連續(xù)切片上使用幾種抗體的面板時
一張幻燈片的染色區(qū)域可以作為陰性/非特異性結(jié)合
其他抗體的背景控制。區(qū)分內(nèi)源性
酶活性或來自特異性的酶的非特異性結(jié)合
免疫反應(yīng)性,額外的患者組織可能僅用
底物色原或酶復(fù)合物(PAP、抗物素-物素、鏈親和素)
和底物色原。
化驗驗證:
在診斷程序中次使用抗體或染色系統(tǒng)之前,
使用者應(yīng)該通過在一系列具有已知免疫組織化學(xué)性能特征的內(nèi)部組織上測試來驗證抗體的特異性
代表已知的陽性和陰性組織。參考質(zhì)量控制
之前在產(chǎn)品插入的本節(jié)中概述的程序以及
CAP認(rèn)證計劃的質(zhì)量控制建議9
免疫組織化學(xué)和/或NCCLS IHC指南10)。這些品質(zhì)
應(yīng)對每批新抗體重復(fù)控制程序,或
每當(dāng)測定參數(shù)發(fā)生變化時。中列出的組織
性能特征部分適用于化驗驗證。
故障排除:
根據(jù)數(shù)據(jù)遵循抗體特異性方案建議
提供的表格。如果出現(xiàn)非典型結(jié)果,請聯(lián)系Biocare的技術(shù)支持
電話。
染色解釋:
陽性組織對照:
用定抗體染色的陽性組織對照應(yīng)
首先進(jìn)行檢查,以確定所有試劑都正常工作。這個
靶細(xì)胞的適當(dāng)染色(如上所述)指示
正反應(yīng)性。如果陽性組織對照未能顯示陽性
染色,任何測試樣本的結(jié)果都應(yīng)被視為無效。
反應(yīng)產(chǎn)物的顏色可能因底物而異
所使用的發(fā)色劑。有關(guān)預(yù)期顏色,請參閱基板封裝插件
反應(yīng)。此外,在
染色方法11
使用復(fù)染劑時,取決于培養(yǎng)時間和
所用復(fù)染劑的效力,復(fù)染會導(dǎo)致著色
細(xì)胞核的。過多或不完整的埋頭孔可能會造成危害
正確解釋結(jié)果。有關(guān)建議,請參閱協(xié)議
復(fù)染。
陰性組織對照:
陰性組織對照應(yīng)在陽性組織后進(jìn)行檢查
對照,以驗證通過
第一抗體。陰性組織中缺乏特異性染色
對照證實抗體對細(xì)胞/細(xì)胞缺乏交叉反應(yīng)性
組件。如果在
陰性外部組織對照,患者樣本的結(jié)果應(yīng)為
被視為無效。
非特異性染色,如果存在,通常具有彌漫性外觀。零星的
結(jié)締組織染色也可在以下切片中觀察到:
福爾馬林過度固定組織。使用完整的細(xì)胞進(jìn)行解釋
染色結(jié)果。壞死或退化的細(xì)胞常有非特異性染色。
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